產(chǎn)品名稱:DNA產(chǎn)物純化試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):D1300
產(chǎn)品特點(diǎn):DNA產(chǎn)物純化試劑盒貨號(hào):D1300規(guī)格:50T/100T保存:常溫干燥保存,復(fù)檢期為一年。本試劑盒采用*的離心吸附柱純化酶切、PCR 等反應(yīng)液中的 DNA 片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其他有機(jī)化合物、 無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。
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DNA產(chǎn)物純化試劑盒
貨號(hào):D1300
規(guī)格:50T/100T
保存:常溫干燥保存,復(fù)檢期為一年。
試劑盒內(nèi)容:
試劑盒組成 | D1300-50T | D1300-100T |
結(jié)合液 | 30ml | 60ml |
漂洗液 | 15ml | 2×15ml |
洗脫液 | 15ml | 30ml |
吸附柱 | 50 個(gè) | 100 個(gè) |
收集管 | 50 個(gè) | 100 個(gè) |
說明書 | 1 份 | 1 份 |
產(chǎn)品說明:
本試劑盒采用*的離心吸附柱純化酶切、PCR 等反應(yīng)液中的 DNA 片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其他有機(jī)化合物、 無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。 使用本試劑盒可回收 100bp-40kb 大小的 DNA 片段, 回收率可達(dá) 80%以上(小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段回收率為 30-50%) 。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。
注意事項(xiàng):在使用本試劑盒前請(qǐng)閱讀此注意事項(xiàng)。
1. 本試劑盒適用于無選擇性地回收溶液中所有 DNA 片段(可去除 50bp 以下的小片段) ,如需選擇性地回收特定片段,同時(shí)去除其他不同大小片段,請(qǐng)選擇瓊脂糖凝膠回收試劑盒。
2. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越小,回收率越低。
3. 回收小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段時(shí),可適當(dāng)延長吸附和洗脫的時(shí)間。
操作步驟: (使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。 )
1、估計(jì) PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積,向其中加入 5 倍體積的結(jié)合液,充分混勻。如 PCR 反應(yīng)體系為 100ul,則加入 500ul 結(jié)合液。
2、將上一步所得溶液加入一個(gè)吸附柱中(吸附柱放入收集管中) ,室溫放置 2 分鐘,12,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放入收集管中。注意:吸附柱大容積為 800ul,若樣品體積大于 800ul 可分批加入。
3、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),12,000rpm 離心 30-60 秒,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
4、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
5、12000rpm 離心 2min,盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,防止漂洗液中的乙醇影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
6、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加適量經(jīng) 65-70℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置2min,12000rpm 離心 2min 收集 DNA 溶液。
注意:
1、為了增加回收效率,可將得到的收集液重新加入吸附柱中,12000rpm 再次離心 2min。
2、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于 30ul,體積過小影響回收效率。
3、洗脫液的 pH 值對(duì)于洗脫效率有很大影響,若用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 7.0-8.5 之間。
7、DNA 產(chǎn)物-20℃保存。
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